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小鼠成纖維細(xì)胞3T3
小鼠成纖維細(xì)胞3T3 株特性：
生長特性：貼壁生長
形態(tài)特征：上皮細(xì)胞
微生物及支原體檢測(cè)：陰性
安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。
（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項(xiàng)：
1、觀察細(xì)胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?/span>10X或20X物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們。
此外，我公司提供實(shí)驗(yàn)服務(wù)如下：
分子生物學(xué)
熒光定量PCR|Real-Time PCR|siRNA設(shè)計(jì)合成|原位雜交|雙熒光素報(bào)告基因|RNA提取|定量PCR|多重PCR|質(zhì)粒構(gòu)建|基因克隆
細(xì)胞生物學(xué)
細(xì)胞培養(yǎng)|MTT檢測(cè)|CCK-8檢測(cè)|細(xì)胞凋亡檢測(cè)|細(xì)胞周期檢測(cè)|siRNA轉(zhuǎn)染|細(xì)胞侵襲|細(xì)胞遷徙|細(xì)胞劃痕
免疫病理學(xué)
免疫組化|免疫熒光|Tunel凋亡|western blot|Elisa檢測(cè)
動(dòng)物造模
急慢性結(jié)腸炎模型|肝纖維化模型|哮喘模型|糖尿病模型|肥胖模型|裸鼠接種腫瘤|非酒精性脂肪肝
